pda培养基如何配置_PDA培养基的配制方法 环球观点

2024-9-22 02:46:44来源:互联网

1、PDA培养基的配方土豆 200g葡萄【táo】糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值【zhí】 自然PDA培养基的【de】配制称【chēng】量和熬煮 按培【péi】养基配方逐一【yī】称取去皮【pí】土豆【dòu】。

2、土豆【dòu】切【qiē】成小块【kuài】放入锅【guō】中,加水1000ml,在加热器上加热至【zhì】沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯【bēi】上过滤,滤【lǜ】渣弃取。

3、滤液补充水分到1000ml。


(资料图)

4、加热溶解【jiě】 把滤液放入锅中,加入【rù】葡【pú】萄糖【táng】20g,琼脂15~20g(提前【qián】搞碎),然【rán】后放在石【shí】棉网【wǎng】上【shàng】,小火加热,并用玻棒不断搅拌【bàn】,以防琼脂糊底或溢出【chū】,待琼脂完全溶【róng】解后,再补充水分至所需【xū】量。

5、分装 按实训要求,将【jiāng】配制【zhì】的培养基分【fèn】装入试管或500ml三角瓶内【nèi】。

6、分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。

7、分装量:固体培养基约为试【shì】管高度【dù】的1/5,灭菌后制成斜面【miàn】,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜【yí】;半【bàn】固【gù】体培养基【jī】以试管高度的【de】1/3为【wéi】宜,灭菌后垂直待【dài】凝。

8、加棉塞 培【péi】养基分装完毕【bì】后,在试管口或三角烧瓶口上塞【sāi】上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以【yǐ】阻止外界微生物进【jìn】入培养基内【nèi】造成【chéng】污【wū】染【rǎn】,并保【bǎo】证有良好【hǎo】的通【tōng】气性能。

9、包扎 加【jiā】塞后,将全【quán】部试管用麻绳或【huò】橡皮筋捆好【hǎo】,再在棉塞外包一层牛皮纸,以【yǐ】防止灭菌【jun1】时冷凝水润湿棉【mián】塞,其【qí】外【wài】再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号【hào】笔注明培【péi】养基【jī】名称、组别、配制日【rì】期。

10、棉塞制作【zuò】说明棉【mián】塞的作用:一是防止杂菌污【wū】染;二是可【kě】过滤【lǜ】空【kōng】气【qì】,保证通气【qì】良好,并可减缓培【péi】养基水分的蒸发,所以【yǐ】正确地制【zhì】备棉塞是培养基制备中【zhōng】重要的一环。

11、正确的棉塞是形状、大【dà】小,松【sōng】紧【jǐn】应与试【shì】管口(或三【sān】角烧瓶)完全适合。

12、过紧则妨碍空气流通,操作不【bú】便;过松时,空气会毫无障碍地【dì】进入试管(或三角【jiǎo】烧瓶)中【zhōng】,达不【bú】到【dào】灭【miè】菌的目的【de】。

13、棉塞【sāi】过【guò】小往往易掉【diào】进试管内,因此棉塞质量【liàng】的优劣对实训的结【jié】果有很【hěn】大的影响。

14、正确的棉塞头【tóu】较【jiào】大,加塞时,应使【shǐ】棉塞长度的1/3留在【zài】试管【guǎn】口外,2/3在试管口【kǒu】内。

15、目前,有条件【jiàn】的实训室【shì】已使【shǐ】用坚固的塑料【liào】试管帽、金属试管【guǎn】帽、硅胶泡沫【mò】塞替代【dài】棉塞,制作棉塞要选纤【xiān】维较长的棉花【huā】,一般不选用脱脂【zhī】棉。

16、因为它容易吸水变湿,造成污染,而且价格也贵。

17、PDA培养【yǎng】基【jī】配制注意事项培养基经灭菌后,必须放在37C温箱【xiāng】培养24h,无菌生长者方【fāng】可【kě】使用。

18、PDA培养基一般不需要调pH。

19、对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。

20、如果培养【yǎng】基偏酸或偏碱时【shí】,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液【yè】进行调节。

21、调节时【shí】应【yīng】逐滴加入【rù】NaOH或HCl溶液,防止局部过酸【suān】或【huò】过碱破坏培养基成分。

22、培养基【jī】在【zài】使用时也可以【yǐ】做【zuò】成不含琼脂【zhī】的液体培养基,用于菌【jun1】类【lèi】的震荡培养。

23、培【péi】养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入【rù】量为0.2g/L培【péi】养基,主【zhǔ】要【yào】是为了抑制【zhì】细菌的【de】生长【zhǎng】,减少干扰性。

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